亚洲高清av_精品精品国产欧美在线观看_超级碰在线_黄色国产_成人在线看片_成人福利在线

網站首頁  ◇  技術支持  ◇  植物基因組DNA提取、酶切及電泳分析
植物基因組DNA提取、酶切及電泳分析
  • 發布日期:2021-08-31     信息來源:      瀏覽次數:2462
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關于植物基因組DNA提取、酶切及電泳分析

      一、目的

      掌握植物基因組DNA提取的一般方法及注意事項。大分子量DNA分子的酶切分析。

      二、原理

      十六烷基三乙基溴化胺是一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復合物,在高鹽溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3

      mol/L

      NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB與核酸的復合物同蛋白質、多糖類物質分開,然后將CTAB與核酸的復合物沉淀溶解于高鹽溶液,再加乙醇使核酸沉淀,CTAB能溶解于乙醇。

      三、試劑與器材

      (一)、試劑

      、DNA extraction 500ml

      31.885g sorbitol (山梨醇)

      6.05g tris PH8.2 (一般不調)

      2Nuclei lysis buffer: 500ml

      100ml 1M Tris PH7.5

      100ml 0.25M EDTA

      200ml 5M NaCl

      10g CTAB

      100ml ddH2O

      35% sarkosyl (N-月桂酰肌氨基鈉鹽) 500ml

      用時,將上述三種溶液按110.4 比例混勻,加入亞硫酸氫鈉(3.8g/l),65℃預熱,既為抽提液。

      (二)器材

      恒溫水浴、研缽、電泳設備

      四、操作步驟

      (一)、基因組DNA提取

      0.15g左右小麥葉片,在液氮中研磨后放入1.5ml離心管中,加入700ml抽體液(65℃預熱)混勻,放入65℃水浴中,裂解40-60分鐘,期間溫和混勻幾次。

      取出裂解好的DNA ,加入700ml氯仿:異戊醇(241),猛烈混勻,離心(1000rpm,10分鐘)。

      取上清于新管中,(不要混入氯仿),加入0.8-1倍預冷異丙醇,緩慢混勻后,再猛烈混勻,使DNA成團,-20℃放半小時以上。

      將析出的DNA 離心,14000rpm,10分鐘。

      去掉上清,將沉淀用1ml 70% 乙醇清洗一次,離心 干燥,溶于50ml ddH2O。

      (二)、酶切及電泳分析

      取四支1.5ml離心管,分別寫上標記:g/EcoRⅠ(學號)、g/HindⅢ(學號)、λ/EcoRⅠ(學號)和λ/ Hind Ⅲ(學號)。

      前兩支試管加入30 ml基因組DNA。后兩支試管加入3mlλ基因組DNA

      前兩支加入5 ml 10×buffer。后兩支加入2ml 10×buffer。

      前兩支分別加入ddH2O 12.5ml,后兩支分別加入ddH2O 13ml

      分別加入RNase 1 ml

      前兩支試管分別加入1.5 ml EcoRⅠHind Ⅲ,10000rpm離心20 S混勻。前兩支試管分別加入1 ml EcoRⅠHind

      ,10000rpm離心20 S混勻。

      37℃反應4h

      0.8%瓊脂糖凝膠電泳(樣品全部點樣)。

      觀察記錄并分析實驗結果

       

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于植物基因組DNA提取、酶切及電泳分析。

       

      我們上海嘉鵬科技有限公司是專業生產超微量核酸蛋白測定儀、化學發光成像系統、凝膠成像分析系統、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質分離純化系統、光化學反應儀、旋渦混合器、恒流泵、自動部分收集器等十幾個系列產品的廠家,歡迎大家前來訂購


    主站蜘蛛池模板: 久久精品视频在线观看榴莲视频 | 成人在线精品视频 | 天天干干 | 国产成人自拍视频在线观看 | 色欧美片视频在线观看 | 欧美一级二级三级 | 欧美综合社区 | 欧美日韩大片在线观看 | www.久久久久久久久 | 免费看91| 国内精品久久毛片一区二区 | 亚洲综合一二三区 | 青青草91| 美女污污视频在线观看 | 偿还的影视高清在线观看 | 天天看天天爽天天摸天天添 | 亚洲区激情区图片小说区 | 国产精品入口麻豆 | 亚洲成人日韩 | 99re视频 | 宅男lu666噜噜噜在线观看 | 久久久久一区二区三区 | 亚洲精品国产第一综合99久久 | 五月婷婷中文 | 欧美精品久久久久久久久老牛影院 | 婷婷五月色综合 | 日本wwww视频 | 天天拍天天干 | 丁香六月综合网 | 可以看av的网站 | 欧美极品一区二区 | 999久久久国产精品 成人不卡视频 | 国产免费一区二区 | 97久久精品人人做人人爽50路 | 天天天天做夜夜夜夜做 | 久久亚洲国产精品 | 天天精品视频免费观看 | 国产精品爱久久久久久久小说 | 亚洲一区二区三区免费在线观看 | 免费电影av| 草草影院地址ccyycom浮力影院37 日日干干夜夜 |